• Pré-requis et Objectifs
• Cours
  • Contenu
    • 1 - Épidémiologie
      • 1.1 - Agent pathogène
      • 1.2 - Vecteur
      • 1.3 - Réservoirs
      • 1.4 - Cycle
      • 1.5 - Répartition géographique
    • 2 - Physiopathologie
    • 3 - Clinique
      • 3.1 - Leishmanioses viscérales
      • 3.2 - Leishmanioses cutanées et cutanéomuqueuses
        • 3 . 2 . 1 - Leishmanioses cutanées localisées
        • 3 . 2 . 2 - Leishmanioses cutanées diffuses
        • 3 . 2 . 3 - Leishmanioses cutanéomuqueuses
    • 4 - Diagnostic biologique
      • 4.1 - Diagnostic de présomption de la leishmaniose viscérale
        • 4 . 1 . 1 - Pancytopénie
        • 4 . 1 . 2 - Hypergammaglobulinémie
      • 4.2 - Diagnostic de certitude
        • 4 . 2 . 1 - Prélèvements
        • 4 . 2 . 2 - Techniques de mise en évidence
        • 4 . 2 . 3 - Diagnostic immunologique
    • 5 - Traitement et prévention
      • 5.1 - Molécules disponibles
        • 5 . 1 . 1 - Antimoniés pentavalents
        • 5 . 1 . 2 - Amphotéricine B liposomale
        • 5 . 1 . 3 - Pentamidine
        • 5 . 1 . 4 - Miltéfosine
        • 5 . 1 . 5 - Autres antileishmaniens
      • 5.2 - Indications thérapeutiques
        • 5 . 2 . 1 - Leishmaniose viscérale
        • 5 . 2 . 2 - Leishmaniose cutanée
        • 5 . 2 . 3 - Leishmaniose cutanéomuqueuse à L. braziliensis
      • 5.3 - Prévention
  • Points essentiels
• Annexes
• Votre Avis

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4  -  Diagnostic biologique

4 . 1  -  Diagnostic de présomption de la leishmaniose viscérale

4 . 1 . 1  -  Pancytopénie

L'anémie, très fréquente, est normochrome, normocytaire, arégénérative et apparaît en premier. La leucopénie intéresse surtout les granulocytes et peut être très profonde. La thrombopénie est plus tardive et reste longtemps modérée.

4 . 1 . 2  -  Hypergammaglobulinémie

Elle est polyclonale et s'accompagne d'hypoalbuminémie. Le déséquilibre des protéines sériques est responsable d'un syndrome inflammatoire (vitesse de sédimentation, CRP…).

4 . 2  -  Diagnostic de certitude

Le diagnostic de certitude repose sur la mise en évidence du parasite, de son ADN et, à l'avenir, d'antigènes circulants.

4 . 2 . 1  -  Prélèvements

Dans la leishmaniose viscérale, c'est la ponction de moelle osseuse pratiquée au sternum ou à la crête iliaque chez le jeune enfant qui est le plus souvent utilisée. La recherche d'ADN sur sang total est privilégiée chez l'immunodéprimé, en raison du caractère peu invasif du prélèvement. La recherche de leishmanies peut aussi s'effectuer sur du foie, des ganglions lymphatiques, la muqueuse digestive ou le liquide bronchiolo-alvéolaire.

La ponction d'une rate fragilisée, dangereuse, n'est pas pratiquée en France.

Dans la leishmaniose cutanée, le prélèvement se fait préférentiellement au niveau de la bordure inflammatoire de la lésion. Il est pratiqué par grattage au vaccinostyle ou à la curette, par aspiration à l'aiguille ou encore par biopsie à l'emporte-pièce.

4 . 2 . 2  -  Techniques de mise en évidence

Le matériel obtenu (par exemple, échantillons de moelle osseuse, prélèvement cutané…) permet de réaliser :

• un examen direct microscopique après étalement sur lame et coloration : le frottis est fixé et coloré par la méthode de MGG. Les formes amastigotes, intracellulaires ou extracellulaires, sont observées sur les frottis, souvent après une recherche longue et orientée ;
• une mise en culture : le prélèvement peut être ensemencé en culture sur gélose au sang : milieu NNN (Novy, McNeal, Nicolle) ou un équivalent (milieu de Schneider) incubé entre 24 °C et 28 °C. La culture est lente et peut nécessiter trois repiquages à 1 semaine d'intervalle avant de conclure à une négativité. Le parasite est, en culture, sous forme promastigote flagellée et mobile, comme chez le vecteur ;
• une recherche d'ADN par PCR : dans le cas de la leishmaniose viscérale, elle permet de poser le diagnostic et est un élément essentiel du suivi des sujets traités, en particulier pour le diagnostic de rechute chez l'immunodéprimé. Dans le cas des leishmanioses cutanées ou cutanéomuqueuses, la PCR s'avère une technique plus sensible que l'examen microscopique. De plus, une identification rapide de l'espèce est aussi possible ;
• un examen anatomopathologique des biopsies.

4 . 2 . 3  -  Diagnostic immunologique

Il est utile essentiellement en cas de leishmaniose viscérale.

Mise en évidence d'anticorps circulants
La leishmaniose viscérale s'accompagne d'une réponse immunitaire humorale, avec apparition de titres élevés d'anticorps sériques, qui peuvent toutefois faire défaut chez l'immunodéprimé. Les leishmanioses cutanées et cutanéomuqueuses sont peu expressives sur le plan sérologique. Les techniques présentent une excellente sensibilité mais une spécificité variable. Les techniques immunologiques les plus utilisées sont l'ELISA, les réactions d'immunofluorescence indirecte, et d'hémagglutination indirecte. L'immunoempreinte (western blot) est la technique la plus sensible.

Mise en évidence d'antigènes circulants
Une méthode (KAtex) a été mise au point pour la détection d'antigènes circulants dans les urines. Elle est en attente de commercialisation en France.