La numération formule sanguine montre une anémie microcytaire hyposidérémique. Discrète au début, son importance dépend de la charge parasitaire. Une hyperleucocytose avec hyperéosinophilie s’observe au début se normalisant progressivement.
La mise en évidence des œufs dans les selles, guidée par l’interrogatoire, un mois après l’infection, permet le diagnostic. Les œufs, caractéristiques, sont émis au stade de 4 blastomères pour A. duodenale et de 8 blastomères pour N. americanus. Mais cet argument ne peut être retenu que lors d’examen de selles récemment exonérées (moins de 3 heures). De nombreuses techniques d’enrichissement ont été proposées. La numération des œufs permet d’estimer l’importance de l’infestation.
La coproculture parasitaire permet de distinguer les deux types de larves, à partir de la morphologie des larves.
Parfois, l’observation d’un adulte évacué au décours du traitement permet d’identifier le nématode en cause par l’observation de la capsule buccale.